紫外分析儀是熒光技術的應用,首先了解一下什么是熒光,熒光又作“螢光”,是指一種光致發(fā)光的冷發(fā)光現(xiàn)象。當某種常溫物質(zhì)經(jīng)某種波長的入射光(通常是紫外線或X射線)照射,吸收光能后進入激發(fā)態(tài),并且立即退激發(fā)并發(fā)出比入射光的的波長長的出射光(通常波長在可見光波段);而且一旦停止入射光,發(fā)光現(xiàn)象也隨之立即消失。具有這種性質(zhì)的出射光就被稱之為熒光。知道了什么是熒光,顧名思義就能想到什么是熒光技術。熒光技術是某些物質(zhì)受一定波長的光激發(fā)后,在極短時間內(nèi)(10-8秒)會發(fā)射出波長大于激發(fā)波長的光,這種光稱為熒光。這一發(fā)光現(xiàn)象在各方面的應用及有關的方法稱為熒光技術。
物質(zhì)經(jīng)過紫外線照射后發(fā)出熒光的現(xiàn)象可分為兩種情況,首先是自發(fā)熒光,如葉綠素、血紅素等經(jīng)紫外線照射后,能發(fā)出紅色的熒光,稱為自發(fā)熒光;第二種是誘發(fā)熒光,即物體經(jīng)熒光染料染色后再通過紫外線照射發(fā)出熒光,稱為誘發(fā)熒光。
紫外分析儀使用方法
1、分析觀察樣品
將電泳好的凝膠或薄層、紙層樣品放在儀器中央(紫外透射玻璃上),開啟“透射、反射紫外燈”開關,使樣品發(fā)出的熒光清晰明亮。通常反射紫外燈離樣品越近,則熒光越強。
2、拍攝樣品照片
(1)在相機前裝上近攝鏡或者近攝接圈PCR濾色鏡。開啟“照明”白熾開關電源,利用白熾燈進行照明,調(diào)節(jié)照相機高度及相機鏡頭便樣品成像清晰。然后關去“照明”電源。
(2)開啟“透射紫外燈”電源,進行拍攝,應根據(jù)不同的樣品確定不同的曝光時間,以獲得清晰滿意的底片。
(3)每次使用完畢,應及時關閉反射、透射紫外燈電源,以保護紫外濾色玻璃,延長使用壽命。
紫外分析儀使用注意事項
1、開啟紫外燈后,不配暗箱分析儀的操作者應戴防護眼鏡或面罩,避免紫外線直接照射,以防損傷。
2、紫外濾色玻璃上切勿壓放重物或跟金屬物體碰、擦,以免造成紫外濾色玻璃損壞。
3、每次使用完畢,須用干凈抹布輕輕將紫外濾色玻璃擦凈,并保持干燥清潔。